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豬藍耳病毒試劑盒

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪問量:1082

更新時間:2024-06-14

簡要描述:

豬藍耳病毒檢測試劑盒原理

本試劑盒針對豬藍耳病毒的高度保守區(qū)域設(shè)計特異性引物和探針,在反應(yīng)體系中含豬藍耳病毒基因組模板的情況下,PCR反應(yīng)得以進行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應(yīng)通道信號進行實時監(jiān)測和輸出,實現(xiàn)檢測結(jié)果的定性分析。

詳細說明:

藍耳病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

使用說明書


產(chǎn)品名稱

通用名:豬藍耳病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)


包裝規(guī)格

96T×1/


檢測原理

   本試劑盒由預(yù)包被豬藍耳病毒重組蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬藍耳病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬藍耳病毒抗體,則將與酶標板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶標結(jié)合物反應(yīng)形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬藍耳病毒抗體。


試劑盒組成

序號

名稱

規(guī)格/96T×1

1

酶標記物

12ml×1(紅蓋)

2

樣品稀釋液

22ml×1(黃蓋)

3

20X濃縮洗滌液

40ml×1(藍蓋)

4

底物液A

6ml×1(白蓋)

5

底物液B

6ml×1(黑蓋)

6

終止液

12ml×1(黃蓋)

7

陽性對照

1.0 ml×1(紅蓋)

8

陰性對照

1.0 ml×1(綠蓋)

9

酶標板

96T×1

10

封板膜

1

11

說明書

1


儲存及有效期

28℃保存,有效期12個月。

包被板開封后請于28℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。


適用儀器

450nm波長的酶標儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。


樣品準備

1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于28℃保存,長期需置-20℃保存。

2.根據(jù)樣本數(shù)量準備對應(yīng)數(shù)量的小刻度EP管或血清稀釋盤,用樣品稀釋液將待檢血清按50倍稀釋(如4μl血清加入196μl樣品稀釋液中,混勻)陰性、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(19份蒸餾水或去離子水加1份濃縮洗滌液)。


檢驗方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標板條,設(shè)陰性、陽性對照各1孔,未用的板條盡快密封,28℃保存。

3.陰性、陽性對照孔分別加入陰性、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃溫箱孵育30分鐘。

5.甩去孔內(nèi)液體,每孔加250ul工作洗滌液,用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。

6.每孔加酶標記物100μl,置37℃避光反應(yīng)30分鐘。

7.甩去孔內(nèi)液體,每孔加250ul工作洗滌液,用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。

8.根據(jù)樣本數(shù)量將顯色液A與顯色液B按等體積比例混勻配置為底物工作液,現(xiàn)配現(xiàn)用。每孔加100ul,置37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液100μl,混勻,于450nm 測定各孔吸光值(OD值),


參考值

實驗正常的情況下,陽性對照OD-陰性對照OD0.2。


檢驗結(jié)果的解釋

1. S/P(樣本OD-陰性對照OD)/(陽性對照OD-陰性對照OD)

2. S/P0.4時結(jié)果判讀為陽性。

3. 0.2S/P0.4時結(jié)果為疑似陽性;若接種過對應(yīng)疫苗,則提示抗體水平不足,建議補打疫苗。

4. S/P0.2時結(jié)果判讀為陰性。


試驗方法的局限性

1. 本試劑盒僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬藍耳病毒抗體的粗略評估。

2. 本試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗。


注意事項

1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。

3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。

4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。

5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。

7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

8.不同批號試劑組分不得混用。


生產(chǎn)企業(yè)

企業(yè)名稱:賽諾利康生物技術(shù)(北京)有限公司

地    址:北京市昌平區(qū)科技園超前路甲111號樓7





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